长吻鮠血液生理生化指标的研究

材料与方法

1.1 试验鱼来源与暂养

试验鱼于2014年8月1日购于天津蓟县蓝科水产养殖有限公司，共32尾，平均体长（18±3） cm/尾，平均体重（150±30） g/尾，置于塑料箱中暂养，气石24 h不间断充气。

1.2 生理生化指标测定方法

血细胞计数采用血球计数板法。

红细胞脆性测试方法如下：取10个小试管，分别加入10 mL不同质量浓度（0.25%、0.30%、0.35%、0.40%、0.45%、0.50%、0.55%、0.60%、0.65%、0.90%）的氯化钠低渗溶液，每个小试管再加入混有肝素的血液一滴，轻轻摇匀，静置1～2 h，根据各管中液体颜色和浑浊度的不同，判断红细胞的脆性。

血糖、甘油三酯、总胆固醇、谷草转氨酶（GOT）、谷丙转氨酶（GPT）、酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、肌酐、乳酸脱氢酶等指标的测定，均使用南京建成生物工程研究所出产的试剂盒及其附带方法。

1.3 数据处理方法

试验数据均使用Excel 2007进行统计处理，结果以平均数±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 血液生理指标

由表1可见，正常长吻鮠血液中红细胞为（2.29±0.53）×1012个/L，而白细胞数相对较少，为（1.51±0.27）×1010个/L，分散在红细胞之间；血红蛋白含量为（8.26±1.00） g/dL；渗透脆性测定中，开始溶血氯化钠浓度为（0.41±0.02）%，完全溶血氯化钠浓度（0.32±0.03）%。

2.2 血液生化指标

由表2可见，正常长吻鮠血清中的血糖浓度为（5.56±2.41） mmol/L；总胆固醇含量为（4.22±1.10） mmol/L；甘油三酯含量为（2.65±1.95） mmol/L；肌酐含量为（22.18±9.16） μmol/L。乳酸脱氢酶活性为（4 022.37±604.71） U/L；碱性磷酸酶活性为（7.66±2.98） U/L；酸性磷酸酶活性为（13.25±2.24） U/L；谷草转氨酶活性为（106.30±22.84） U/L；谷丙转氨酶活性为（42.53±20.26） U/L。乳酸脱氢酶活性远高于其他酶类，碱性磷酸酶活性最低。

3 小结与讨论

3.1 长吻鮠血液细胞数与血红蛋白含量

鱼类血细胞参数是血液指标的重要组成部分，参数特征可以用来反映鱼体健康状况以及生存环境情况。血红蛋白是红细胞中负责运载氧的一种蛋白质，它和红细胞的主要功能是携带与运输氧气，以满足鱼类正常的生命活动的需要。所以红细胞数值与血红蛋白含量直接反映了机体的耐低氧能力[19]。另外，鱼类营养状况对其血液指标产生重要影响。钱云霞等[6]对养殖鲈鱼的饥饿试验发现饥饿对鲈鱼血液生理生化指标产生显著影响。鲈鱼在饥饿2周后，红细胞的数目便开始显著下降。南方鲶鱼饥饿后，红细胞数与血红蛋白含量急剧下降[12]。在本试验中，长吻鮠红细胞数目为（2.29±0.53）×1012个/L，血红蛋白含量为（8.26±1.00） g/dL。赵海鹏[20]对野生长吻鮠的研究结果中，红细胞数目为（1.85±0.53）×1012个/L，血红蛋白含量为（4.75±0.56） g/dL。由此看出，养殖的长吻鮠的红细胞数目与血红蛋白含量都比野生长吻鮠的高。这可能是由于长吻鮠在养殖条件下饵料比较充足，营养丰富；而野生长吻鮠可能经常受到饥饿与营养不良的影响，血液的运输氧的能力下降，代谢水平降低。

白细胞是机体与疾病斗争的“卫士”，它担负着许多重任，具有吞噬异物并且产生抗体的作用。还具有抗御病原入侵、机体伤病的损伤治愈、对疾病的免疫抵抗能力等。当机体出现不适时，便启动机体的免疫防御机制，通过升高白细胞数量增加自身抵抗力，来维持机体基本生命活动。白细胞参数存在性别差异，赵明蓟等[11]对鲤和草鱼的研究发现，白细胞在性腺已经成熟或接近成熟时才表现出两性差异。长吻鮠的白细胞数量为（1.51±0.27）×1010个/L，黄颡鱼[21]的白细胞数为（3.38±0.25）×1010个/L，二者生活习性相似，但长吻鮠的白细胞比黄颡鱼少得多。这可能是长吻鮠的免疫力、抗病力差，更容易患病的重要原因之一。

3.2 长吻鮠血液红细胞脆性

红细胞的膜对低渗溶液具有一定的抵抗力，这一特征称之为红细胞的渗透脆性。红细胞膜对低渗溶液的抵抗力越大，红细胞在低渗溶液中越不容易发生破碎，也就是红细胞渗透脆性越小。有关红细胞渗透脆性指标的测定较少。在本试验中，长吻鮠红细胞开始出现溶血时氯化钠浓度为（0.41±0.02）%，完全溶血时氯化钠溶度为（0.32±0.03）%。瓦氏黄颡鱼[22]刚溶血时对应的氯化钠浓度是（0.45±0.01）%，完全溶血时对应的氯化钠浓度是（0.27±0.01）%。这表明长吻鮠红细胞对低渗溶液的抵抗力与瓦氏黄颡鱼相近，这可能与它们的生活习性相似有关。

3.3 长吻鮠血液中血糖、总胆固醇、甘油三酯和肌酐的含量

糖、脂肪、蛋白质是鱼类获得能量的重要来源。葡萄糖是许多组织的必需燃料，是机体维持基本生命活动的保证。鱼体的血糖浓度容易受到外界刺激而变化。鲈鱼在饥饿7 d后血糖浓度显著降低，之后保持相对稳定[6]。鱼类在受伤或患病的时候，血糖浓度也会变化，如患有败血症的鲢鱼其血糖浓度显著升高[23]。长吻鮠与鳙鱼[24]、草鱼[24]血糖、甘油三酯等生化指标见表3。由表3可知，长吻鮠的血糖浓度最低，草鱼的血糖浓度最高。林光华等[25]认为，鱼类的活动性和食性影响它的血液指标的高低。一般活动性越强的鱼类，血糖含量越高。养殖的长吻鮠多静卧于池底，活动性较弱，需要较少能量来维持运动，草鱼力大性刚，性情活泼，活动性较强。因而，血糖浓度与鱼类的生活习性息息相关。

总胆固醇是血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和，是脂肪在血液中存在的一种形式。胆固醇在生物学中起着重要作用，是一些激素和酶类的合成原料，鱼类正常生命活动的必需物质[26]。甘油三酯是鱼类脂类代谢的主要物质，体脂高的鱼类血脂一般也高，血脂与体脂有正相关性[27]。肌酐主要是肌酸与磷酸肌酸代谢的最终产物，因此，肌酐含量与肌肉活动密切相关[28]。肌酐的产量一定，而且不会在过滤后被肾小管重吸收，它的排泄量能够反映出肾脏的机能。当肾脏发生病变时，肌酐排泄受阻，血液中肌酐含量显著升高[29]。由表3可见，长吻鮠甘油三酯与总胆固醇含量与草鱼较为接近，高于鳙鱼。肌酐含量排序为鳙鱼>草鱼>长吻鮠。长吻鮠为养殖鱼类，比较容易获取饵料，活动量较少，因而肌酐含量少。正由于活动量少，消耗的能量较低，所以贮存的脂肪较多，总胆固醇与甘油三酯含量较高。与此相对应，鳙鱼为滤食性鱼类，主要以浮游动物为食，需要长时间活动来滤取食物，活动量较大，因而血清中肌酐含量较高，总胆固醇与甘油三酯含量低。至于总胆固醇、甘油三酯含量与肌酐的具体关系有待更深入的研究。

3.4 长吻鮠血液生化指标

碱性磷酸酶是一种重要的代谢调控酶，直接参与磷酸基团的转移，并且也是鱼类溶酶体酶的重要组成部分，在免疫过程中发挥重要作用[9]。酸性磷酸酶是巨噬细胞溶酶体的标志酶，在血液与血细胞中起重要的机体防御功能[30]。血细胞进行吞噬过程中，会伴随着酸性磷酸酶的释放。

谷丙转氨酶和谷草转氨酶在蛋白质代谢中起重要的作用，是鱼类生命活动中不可缺少的酶类之一。它们是存在于线粒体中的重要的氨基酸转氨酶，血清中它们的活性一般不高。谷草转氨酶主要存在于肝脏中，它能够反映出肝脏的生理状态[31]。当组织发生病变或者组织受损较为严重时，谷丙转氨酶便会释放到血液中，血清中谷丙转氨酶含量便会显著提高。它是肝细胞坏死的最具有特异性和应用最广泛的指标[32]。

从图1可以看出，长吻鮠与黄颡鱼除碱性磷酸酶活性有差异外，其他酶活性均比较接近。可能由于长吻鮠与黄颡鱼都属于底层肉食性鱼类，生活习性相似的原因。

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