5种杀菌剂对山茶枯斑病菌的室内毒力测定

材料与方法

2.1菌种来源

山茶枯斑病样本分别采自贵州遵义桐梓县松坎镇、正安县土坪镇及遵义市区凤凰山、三阁公园，采集有山茶枯斑病典型症状的山茶叶部样本经分离、纯化和致病性鉴定[2]，最终确定是由交链格孢菌（Alternaria alternata）引起的，将其置于4℃的环境下保存备用。

2.2供试药剂

毒力测定所采用的5种实验药剂名称、剂型、生产厂家见表1。

2.3试验方法

以大田施用浓度为参考值，按有效成分从高浓度到低浓度逐步测试，每种药剂选定5个浓度进行测定，每个处理重复3次，通过预实验得出杀菌剂的浓度梯度如表2。然后将供试菌株接种于PSA培养基上，25 ℃培养5 d，待菌丝长满培养皿后，用无菌的打孔器打取直径

为5 mm的菌饼备用[3]。

采用生长速率测定法，测定致病菌的菌丝在上述5种药剂中的敏感性，从而筛选高效的药剂。将上述药剂分别配制成所需浓度10倍的药剂，取1 mL加入9 mL约50 ℃的PSA中混匀，倒入培养皿中制成含藥平板，中央接入直径为5 mm的菌饼，27 ℃下培养3 d后测量菌落直径，计算抑菌率[4，5]：

抑菌率（%）=（对照菌落直径-5）-（处理菌落直径-5）（对照菌落直径-5）×100

将抑菌率换算成抑制几率值，以设定的药剂浓度的对数值为横坐标，抑制几率值为纵坐标，作回归曲线，求得杀菌剂对该菌的抑制回归方程Y=A+BX和抑制浓度（EC50）及相关系数（r）。EC50值与药剂毒力大小成反比，EC50值越小，说明毒力越强[6～8]。试验结果如表3。

4试验结果

试验结果表明（图1，表2），5种药剂对山茶枯斑病菌菌丝生长均有一定的抑制作用，5种药剂的EC50值结果显示，35%快克菌灵最大，13563.7054ug/ml，75%百菌清最小，为145.6829ug/ml。综合杀菌剂的EC50值，对山茶枯斑病病菌菌丝生长的抑制作用75%百菌清最强，其次是20%井.唑.多菌灵，35%快克最弱。

5讨论与结论

本试验以5种药剂对山茶枯斑病病原菌进行了毒力测定，这5种药剂对该病原菌都有一定的抑制作用，但抑制效果不同。通过本试验，可以初步确定75%百菌清和20%井唑多菌灵者两种杀菌剂为防治山茶枯斑病的高效药剂。在综合考虑病害防治成本的前提下，应该合理确定田间使用浓度，本研究是在室内离体条件下进行的，但在试验过程中得到的试验数据是否可以运用于实际生产中，还待进行田间试验明确供试药剂对山茶枯斑病的防效，为生产上山茶枯斑病防治药剂的选择提供理论依据。表2不同杀菌剂对山茶枯斑病菌的室内测定

药剂毒力回归方程Y=A+BX EC50/（μg/mL）相关系数/r20%井唑多菌灵y=0.4840+1.8726x257.9576r=0.914975%百菌清

参考文献：

[1]张艳芳，屈爱桃.山茶花的研究进展[J].中国名族医药杂志，2012，10（10）：41～44.

[2]方中达.植病研究方法（第三版）[M].北京：中国农业出版社，1994.

[3]纪兆林，刘娟，童蕴慧，等.不同杀菌剂对桃流胶病的毒力测定[J].中国南方果树，2012，41（4）：39～41，46.

[4]陆铮铮，肖仲久，蒋选利.几种杀菌剂对辣椒胶孢炭疽菌的室内毒力测定[J].植物医生，2010，23（4）：8～10.

[5]李小霞，肖仲久，李凤华.5种杀菌剂对苏铁叶枯病病菌的室内毒力测定[J].江苏农业科学，2012，40（4）：143～144.

[6]李石磊，劉君昂，赵莹，等.6种杀菌剂对油菜主要病害的室内毒力测定[J].中南林业科技大学学报，2013，33（9）：60～62.

[7]胡秀荣，鹿连明，蒲占湑，等.7种杀菌剂对柑橘炭疽病菌的室内毒力测定[J].中国农学通报，2010，26（11）：272～275.

[8]鲁鹏，肖仲久，李小霞，等.白术白绢病菌的生物学特性及杀菌剂对其室内毒力测[J].贵州农业科学，2010，38（8）：90～93.

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