藜芦与白头翁提取液对人参黑斑病菌的抑菌活性

材料与方法

1.1材料

试验材料：藜芦与白头翁分别采集于吉林省安图县。样品经清洗，阴干，粉碎备用。供试菌株：人参黑斑病菌（Alternaria panax Whetz），由延边大学农学院植物病理学教研室提供。供试药剂：甲醇、丙酮、乙醇由天津市科密欧化学试剂有限公司生产。

1.2 方法

1.2.1 提取液的制备

将采集的藜芦与白头翁阴干后用粉碎机制成粉末，各取50 g，分别用甲醇、乙醇、丙酮，用索氏提取器提取8 h，再浓缩到50 mL，即为各提取液的母液，提取液经0.22 μm滤膜除菌，4 ℃冰箱贮存备用。

1.2.2 提取液抑菌活性的测定

采用生长速率法测定提取液对人参黑斑病菌的抑菌作用，将每种提取液配成不同浓度后，在超净工作台中，将经高温高压灭菌的马铃薯琼脂葡萄糖培养基，加入不同浓度提取液制成平板，每处理设3次重复。用内径为7 mm的打孔器在菌落边缘打菌饼，放入含提取液平板中央，以不加提取液的平板接菌饼作对照，于25 ℃恒温箱中培养。连续六天测量菌落直径，取第六天的数据计算不同杀菌剂对人参黑斑病菌菌丝生长的抑制率。计算公式如下：

以处理浓度对数为横坐标，不同浓度下的抑制生长率转换成机率值为纵坐标绘制出毒力曲线，求出毒力直线回归方程、相关系数、抑制中浓度（EC50）值。

2 结果与分析

2.1 藜芦不同溶剂提取液对人参黑斑病菌的抑菌效果

藜芦不同溶剂提取液对人参黑斑病菌菌丝生长的抑制作用见图1-3，提取液的抑菌活性均随着浓度的增大而增强，且剂量与毒力呈正相关。其中藜芦甲醇提取液回归方程为y=1.6868x+2.4601，EC50=32.0442 μg·mL-1，相關系数r=0.9707;藜芦丙酮提取液回归方程为y=1.3663x+2.8674，EC50=36.3800μg·mL-1，相关系数r=0.8865;藜芦乙醇提取液回归方程为y=1.7618x+2.5928，EC50=23.2500μg·mL-1，相关系数r=0.9367。

2.2白头翁不同溶剂提取液对人参黑斑病菌的抑菌效果

白头翁不同溶剂提取液对人参黑斑病菌菌丝生长的抑制作用见图4-6，提取液的抑菌活性整体上随着浓度的增大而增强，且剂量与毒力呈正相关，只有在乙醇提取液上呈先降后生的趋势。其中白头翁甲醇提取液回归方程为y=1.9188x+2.4402，EC50=21.8050 μg·mL-1，相关系数r=0.9567;白头翁丙酮提取液回归方程为y=1.6652x+2.5688，EC50=28.8400μg·mL-1，相关系数r=0.9492;白头翁乙醇提取液回归方程为y=1.1908x+3.1510，EC50=35.7100μg·mL-1，相关系数r=0.9072。

综上所述，根据试验结果表明藜芦与白头翁的甲醇、乙醇、丙酮提取液对人参黑斑病菌均存在不同程度的抑菌效果，说明藜芦与白头翁均是具有一定抑菌作用的植物。采用不同溶剂提取的抑菌效果比较，藜芦的药用成分提取最好使用乙醇，而白头翁的药用成分提取最好使用甲醇。

通过试验筛选出了对人参黑斑病菌具有较强抑菌活性的提取液，为进一步田间药效试验奠定了基础。而提取液在田间对人参黑斑病的防治效果、作用机理以及对人参的生长是否有影响，还有待于进一步的研究。

（作者单位：133002吉林延吉延边大学农学院）

推荐访问:白头翁 黑斑 病菌 人参 活性

---