山东地区不同苹果全爪螨种群对4种杀螨剂的抗药性检测

摘要：【目的】为明确山东省主要苹果产区苹果全爪螨的抗药性现状，指导对其进行田间药剂防治，【方法】采用玻片浸渍法测定了山东省11地区苹果全爪螨田间种群对4种常用杀螨剂的抗药性。【结果】结果表明，费县种群对4种杀螨剂的LC50均最低，因此视为相对敏感种群；另外10个苹果全爪螨田间种群中，蓬莱种群对阿维菌素的LC50最高，为0.969 5 mg·L-1，相对抗性倍数为34.14倍；平度种群对哒螨灵的LC50最高，为270.332 7 mg·L-1，相对抗性倍数为52.76倍；荣成种群对三唑锡的LC50最高，为61.866 8 mg·L-1，相对抗性倍数为48.41倍；文登种群对炔螨特的LC50最高，为56.854 8 mg·L-1，相对抗性倍数为6.42倍。【结论】不同地区苹果全爪螨田间种群对药剂的抗性存在差异，应根据当地的抗性水平有针对性地进行抗性治理，以避免或延缓苹果全爪螨对杀螨剂产生抗药性。

关键词： 苹果全爪螨； 玻片浸渍法； 抗药性； 杀螨剂

中图分类号：S661.1 文献标志码：A 文章编号：1009-99802012 06-1083-05

苹果全爪螨[Panonychus ulmi（Koch）]属蜱螨目叶螨科（Tetranychidae），是世界性果树害螨，在日本、印度、加拿大、阿根廷和欧洲等地均有分布，我国大部分苹果产区都有发生，尤以北方地区发生严重[1]，其主要寄主有苹果、梨、桃、杏、山楂、海棠、樱桃、沙果等，其中以苹果受害最为严重。该螨以成螨和幼若螨集中在果树叶芽和叶片上刺吸汁液危害，可使叶片失绿，组织增厚变脆，影响光合作用，造成严重减产[2]。目前，对苹果全爪螨的防治仍以化学防治为主，长期以来由于杀螨剂的大量使用，果园的生态平衡遭到破坏，天敌数量大量减少，降低了对苹果全爪螨的控制作用[3]；另一方面，由于苹果全爪螨世代多，繁殖快，对杀螨剂易产生抗药性，增加了药剂防治的难度[4-7]。为了明确山东省主要苹果产区苹果全爪螨的抗药性现状，本研究以山东省11个代表地区的苹果全爪螨种群为试虫，分别检测了其对阿维菌素、三唑锡、哒螨灵和炔螨特4种常用药剂的抗性水平，旨在明确山东省不同苹果产区苹果全爪螨的抗药性现状，为农药的合理使用和抗药性治理提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 供试药剂

90%阿维菌素（abamectin）原药，华北制药集团爱诺有限公司生产；95%哒螨灵（pyridaben）原药，南京红太阳股份有限公司生产；95%三唑锡（azocyclotin）原药，山东省三联招远化工厂生产；90.6%炔螨特（propargite）原药，山东省三联远东化学有限公司生产。

1.2 供试试虫

苹果全爪螨分别采自山东省费县大田庄乡、烟台市福山区东陌堂村、莱西市郊区、蓬莱市郊区、平度市东郊、栖霞市中桥镇、荣成市郊区河西村、泰安市道朗镇、潍坊市寒亭区郊区、文登市郊区西马村和沂源县中庄镇等11苹果产区的代表性苹果园的苹果树上，选择个体一致、健康的田间成螨作供试虫；苹果品种均为红富士，苹果生育期为幼果期；各果园用药情况与当地用药基本一致。

在11个代表性苹果产区中，费县大田庄乡处鲁中山区，周围环山，果园位置地势偏远，为近年来新发展的果树种植区，苹果种植历史仅为4年，用药水平较低，苹果全爪螨对常用药剂较敏感，以此种群作为相对敏感种群。

1.3 室内毒力测定方法

室内毒力测定参照FAO（联合国粮农组织）推荐的玻片浸渍法（Slide-dip method）和赵卫东等[8]的方法，将双面胶带剪成2～3 cm长，贴在显微镜载玻片的一端，用镊子揭去粘胶上的纸片，用零号毛笔挑取大小一致、体色鲜艳、行动活泼的成螨，将其背部粘在双面胶带上（注意：不要粘住螨足、螨须和口器），每片粘30头。在温度（25±1） ℃，相对湿度为85%的生化培养箱中放置4 h后，用双目镜观察，剔除死亡或不活泼个体。在室内测定比较苹果全爪螨对阿维菌素、三唑锡、哒螨灵和炔螨特4种药剂的敏感性差异。将阿维菌素原药、三唑锡原药、哒螨灵原药和炔螨特原药用分析纯丙酮稀释成不同浓度的母液，再用蒸馏水稀释成5～7个供试浓度，将试虫在各药剂浓度中浸渍5 s后取出， 用滤纸吸干多余药液， 放在光照培养箱中，在25 ℃下经24 h后，利用双目解剖镜检查结果，检查时，用小毛笔尖轻轻触及螨体，无反应者记为死亡个体，每一浓度3个重复。另以丙酮水溶液（丙酮< 1%）为对照，对照组死亡率在10%以内为有效试验。

1.4 数据分析

利用SPSS 16.0软件中的Probit功能计算致死中剂量及相关参数。

相对抗性倍数=抗性种群的LC50/相对敏感种群的LC50。

抗性水平分级标准为[9-10]：抗性倍数3 倍以下为敏感；3～5 倍为敏感性降低；5.1～10 倍为低水平抗性；10.1～40 倍为中等水平抗性；40.1～160倍为高水平抗性；大于160.1 倍为极高水平抗性。

2 结果与分析

2.1 山东省11地区苹果全爪螨对4种杀螨剂的抗性测定

山东省11地区苹果全爪螨种群对阿维菌素的抗性水平见表1。费县种群对阿维菌素表现最为敏感，因此作为阿维菌素的相对敏感种群。11个种群的致死中剂量LC50（0.028 4～0.969 5 mg·L-1）从小到大依次为：费县、文登、泰安、潍坊、莱西、福山、平度、荣成、栖霞、沂源和蓬莱。与相对敏感种群（费县种群）相比，蓬莱种群对阿维菌素的抗性倍数最高为34.14倍，其次为沂源、栖霞和荣成，其抗性倍数分别为32.35、20.90和10.95倍，属中等水平的抗性；平度、福山、莱西和潍坊种群对阿维菌素的抗性倍数分别为9.99、7.89、7.61和5.79倍，属低水平的抗性；泰安和文登种群对阿维菌素的抗性倍数分别为2.35和2.12倍，属敏感种群。

费县种群对炔螨特表现最为敏感，因此作为炔螨特的相对敏感种群。与相对敏感种群（费县种群）相比，文登、沂源、平度、栖霞种群对炔螨特的抗性倍数分别为6.42、6.00、5.48和5.02倍，属低水平抗性；蓬莱、荣成和福山种群对炔螨特的抗性倍数分别为4.42、3.57和3.08倍，属敏感性降低；莱西、泰安和潍坊种群对炔螨特的抗性在1.27～2.20倍，属敏感种群（表4）。

3 讨 论

抗药性的检测是害虫（螨）抗性治理的一项重要基础工作，对开展预防性抗性治理和评估抗性治理效果十分重要[11-12]。通过抗药性检测可提供早期预警、明确抗药性水平、抗药性动态分布，为田间药剂的使用和害虫（螨）的持续控制提供理论基础[13-14]。

昆虫的抗药性，在遗传学范围内可以解释为狭义的生物学微进化（或阶段性进化）（micro-evolution），是杀虫药剂选择作用的结果。苹果全爪螨的抗药性发展与药剂的选择压力有关，不同地理区域由于用药历史和用药水平以及杀螨剂对害螨作用方式的差异，苹果全爪螨对杀虫剂的抗性发展程度不同，在苹果全爪螨发生危害较严重的地区，连续多次、高剂量使用1种或同类型杀虫剂很容易产生抗性。研究结果显示，影响害螨抗性的因素很多，孟和生等[15]报道，桔全爪螨哒螨灵抗性品系对多种杀螨剂都有交互抗性。本研究所选定的11个地区为山东省的苹果主产区，用药情况比较复杂，用药习惯和用药水平均不一致。生物测定结果表明，苹果全爪螨对杀虫剂的抗药性在不同地域之间存在显著差异，这种差异主要是由于杀虫剂使用次数不同而造成的，其他杀螨剂的交互抗性也可能是重要的影响因素。苹果全爪螨对杀虫剂的抗性同杀虫剂使用频率呈正相关，如沂源采样果园每年喷施3～4次阿维菌素防治全爪螨，但并未使用哒螨灵，本文研究结果显示该区全爪螨种群对阿维菌素产生中等水平抗性，对哒螨灵尚处于敏感阶段；文登采样果园每年喷施2～3次哒螨灵防治全爪螨，有时间隔喷施一次或不喷施阿维菌素，本文研究结果显示该区全爪螨种群对哒螨灵产生中等水平抗性，对阿维菌素尚处于敏感阶段。

阿维菌素、哒螨灵、三唑锡和炔螨特是近年来生产上大量使用的杀螨剂。阿维菌素属于生物类杀螨剂，作用机制是刺激神经传递介质γ-氨基丁酸的释放，干扰正常的神经生理活动，使害虫在几个小时内迅速麻痹、拒食、缓动或不动，因此对成螨、若螨和幼螨均有高效[15]。哒螨灵是一种高效广谱杀螨剂，触杀性强，无内吸、传导和熏蒸作用，对全爪螨Panony chus、叶螨Tetrany chidae、小爪螨Oligony chus 等植食性害螨均具有很好的防治效果，是目前国内外较好的杀螨剂[16]。三唑锡和炔螨特为专用杀螨剂，对卵、若螨和成螨均有效[17-18]。通过生物测定发现，所测定的部分地区对4种药剂已经产生不同程度的抗性，在抗性地区应该选择使用其他杀螨剂。

杀虫（螨）剂轮用和混用是当前害虫（螨）抗药性治理中最常采用的2种用药策略[19-21]。因此，在防治苹果全爪螨的过程中，不仅要根据不同地区苹果全爪螨的抗性水平选择药剂，还要注意将不同类型、不同作用方式的杀螨剂轮用或混用，以发挥最理想的控螨效果，同时也能延缓抗药性的发生和发展。此外，还应与农业、物理、生物防治等措施有机结合起来，以延长杀螨剂的使用寿命，使之在生产中发挥更大作用， 同时为新杀螨剂的创制留出更多空间[22-24]。

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