RF\抗CCP抗体和AKA对类风湿关节炎诊断的实验检测分析

【摘要】目的：探讨类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸多肽（CCP）抗体及抗角蛋白抗体（AKA）3种实验室检测指标在类风湿关节炎诊断中的意义。方法：对65例类风湿关节炎和65例非类风湿关节炎患者用速率散射比浊法检测RF，酶联免疫吸附法检测抗CCP抗体，间接免疫荧光染色法检测AKA，比较各指标诊断类风湿关节炎的灵敏度及特异度。结果：类风湿关节炎患者的3种指标阳性率均明显高于非类风湿关节炎患者，差异有统计学意义（P < 0.05）。3种指标单独检测对类风湿关节炎诊断的灵敏度、特异度分别是RF为84.62%、72.31%，抗CCP抗体为76.92%、93.92%，AKA为58.46%、90.77%；联合检测使用串联诊断试验计算对RA诊断的灵敏度、特异度分别是RF+抗CCP抗体为73.85%、95.38%，RF+AKA为56.92%、92.31%，RF+抗CCP抗体+AKA为50.77%、98.46%；RF在抗CCP抗体、AKA分别阴性的类风湿关节炎患者中检出率分别为46.67%和33.33%；抗CCP抗体和AKA在RF阴性的类风湿关节炎患者中的阳性率分别为70.00%和50.00%。结论：对类风湿关节炎的诊断，单独检测RF和抗CCP抗体灵敏度高，抗CCP抗体和AKA特异度高，有较好的临床使用价值。3种抗体联合检测，串联试验计算特异度较高，不易误诊，可提高类风湿关节炎的诊断率。

【关键词】关节炎，类风湿；类风湿因子；抗环瓜氨酸肽抗体；抗角质蛋白抗体；联合检测；串联试验计算；诊断

doi:10.3969/j.issn.2095-4174.2014.06.004

Analysis of RF,Anti-CCP Antibody and AKA on the Diagnosis of Rheumatoid Arthritis

WANG Shao-hua,YU Feng-chun,WANG Ji-hong,YU Wen-guang

【ABSTRACT】Objective:To investigate the significance of RF,anti-CCP antibody and AKA in the diagnosis of Rheumatoid Arthritis.Methods:RF,anti-CCP antibody and AKA of 65 cases of rheumatoid arthritis and 65 cases of non rheumatoid arthritis were detected respectively by ways of nephelometry,enzyme linked immunosorbent assay,and indirect IF staining,comparing the sensitivity and specificity of each index in the diagnosis of rheumatoid arthritis.Results:The positive rates of the 3 indexes in patients with rheumatoid arthritis were significantly higher than those without rheumatoid arthritis,the difference being statistically significant （P < 0.05）.The sensitivity and specificity of each index in diagnosis of rheumatoid arthritis were respectively 84.62% 72.31% of RF,76.92% and 93.92% of anti-CCP antibody,and 58.46% and 90.77% of AKA;the compound sensitivity and specificity were respectively 73.85% and 95.38% of RF+ anti-CCP antibody,56.92% and 92.31% of RF+AKA,and 50.77% and 98.46% of RF+ anti-CCP antibody +AKA;the detection rates of RF in patients with negative anti-CCP antibody and AKA were respectively 46.67% and 33.33%;the positive rates of anti-CCP antibody and AKA in patients with negative RF were respectively 70% and 50%.Conclusion:In the diagnosis of rheumatoid arthritis,separate detection of RF and anti-CCP antibody has high sensitivity,and anti-CCP antibody and AKA have high specificity,worthy of clinical application.While combined detection of the antibodies has a high specificity,difficult to be misdiagnosed,which can improve the diagnosis rate of rheumatoid arthritis.

【Keywords】 arthritis,rheumatoid;rheumatoid factor;anti-CCP antibody;anti keratin antibody;joint detection;the series calculation;diagnosis

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是以对称性多关节滑膜慢性炎症为主要表现的自身免疫性疾病。如不能及时诊断和治疗，病情逐渐发展导致关节畸形和功能丧失而致残，因此早期诊断和早期治疗至关重要。笔者对65例RA患者进行RF、抗CCP抗体及AKA检测并分析，探讨其在RA诊断中的参考价值，现总结报告如下。

1临床资料

1.1一般资料选取2012年1月至2013年12月

在本院就诊的门诊和住院RA患者65例，设为RA组。同时随机选取65例非RA患者作为对照，设为非RA组。RA组男29例，女36例；年龄25～68岁，平均（36.5±10.5）岁。非RA组男30例，女35例；年龄24～66岁，平均（37.2±9.8）岁；其中血清阴性脊柱关节病11例，骨关节炎13例，系统性红斑狼疮8例，原发性干燥综合征5例，痛风5例，系统性硬化病2例，正常健康体检者21例，均符合相应疾病的诊断标准。两组患者在性别、年龄等方面比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。

1.2诊断标准按照美国风湿病学会（ACR）1987年修订的诊断分类标准［1］。

2方法

2.1RF检测采用美国Beckman公司生产的IMMAGE自动分析仪进行检测，采用速率散射比浊法，以RF值> 20 IU·mL-1为阳性。

2.2抗CCP抗体检测试剂盒由上海科新生物技术股份有限公司提供，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法。以抗CCP抗体值< 20 U为阴性，≥20 U为阳性。

2.3AKA检测试剂盒由德国欧蒙医学实验诊断有限公司提供，采用间接免疫荧光法（IIF）检测。以荧光显微镜下观察角质层出现线状、板层状的典型荧光染色评定为阳性。

2.4观察方法根据灵敏度和特异度观察3种抗体单独检测和联合检测对RA诊断的敏感性和特异性。灵敏度即患者中得出阳性检测的样本占患者总数的百分比，特异度即健康人中得出阴性检测的样本占健康人总数的百分比。灵敏度=真阳性人数/（真阳性人数+假阴性人数）×100%，特异度=真阴性人数/（真阴性人数+假阳性人数）×100%。联合检测时使用串联诊断试验方法计算灵敏度和特异度，以每一项试验均为阳性时才视为阳性。

2.5统计学方法采用SPSS 11.0软件进行统计分析。治疗前后和组间比较采用t检验；计数资料以百分率表示，采用χ2检验比较其差异性。以

P <0.05为差异有统计学意义。

3结果

3.1两组RF、抗CCP抗体和AKA阳性率比较RA患者的RF、抗CCP抗体和AKA阳性率均明显高于非RA患者和正常健康者，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表1。

3.23种抗体单独检测对RA诊断的灵敏度和特异度比较单独检测时灵敏度，RF与抗CCP抗体比较，差异无统计学意义（P > 0.05），RF和抗CCP抗体两者与AKA比较，差异均有统计学意义

（P < 0.05）。单独检测时特异度，RF与抗CCP抗体和AKA差异均有统计学意义（P < 0.05），抗CCP抗体和AKA比较，差异则无统计学意义

（P > 0.05）。见表2。

3.33种抗体联合检测对RA诊断的灵敏度和特异度比较3种抗体联合检测，使用串联诊断试验计算方式比较，灵敏度由高到低依次为：RF+抗CCP抗体> RF+AKA> RF+AKA+抗CCP抗体。前两者与后者比较，差异均有统计学意义（P < 0.05）。特异度由高到低依次为：RF+AKA+抗CCP抗体 > RF+抗CCP抗体> RF+AKA，差异无统计学意义

（P > 0.05）。见表3。

3.4RF检测在抗CCP抗体、AKA阴性的RA中的阳性结果在抗CCP抗体阴性的15例RA患者中，7例患者RF阳性，占46.67%；在AKA阴性的27例者中，9例患者RF阳性，占33.33%。

3.5RF阴性的RA患者中抗CCP抗体和AKA的阳性结果在RF阴性的10例RA患者中，7例患者抗CCP抗体阳性，占70.00% ；5例AKA阳性，占50.00%。

4讨论

RA属于自身免疫性疾病，致残率较高，早期诊断特别重要，也是目前临床研究的热点。RF是ACR 1987年修订的RA诊断标准中唯一实验室指标，检测方法较多，特异度较低，无论采用何种检测方法，都不能以RF阳性来诊断RA。70%～80%的RA患者的血清中可检测到RF，但在早期患者中可能并不存在，又因为RF在系统性红斑狼疮、干燥综合征、心内膜炎、伯克氏肉样瘤、肝和肺疾病的患者中存在［2］，甚至一些感染性疾病患者和正常老年人血清中也有一些阳性率［3］，较大地限制了RF在RA诊断中的价值，易造成误诊和漏诊。RF灵敏度高，特异度不强，可用于筛查RA。

抗CCP抗体用于RA诊断于2000年国外首次报道，是以IgG型为主的抗体，用于ELISA检测，对RA具有很高的特异度和灵敏度［4］，可出现在RA早期，对RA的诊断有较高的特异度，已成为RA更具特异度的标志［2］。ACR/EULAR 2009年RA分类标准和评分系统［1］是实验室检测指标之一，与RA发病相关，既反映RA病情活动［5］，也不同程度反应骨关节破坏程度及预后，对预测疾病的严重性具有较高价值。抗CCP抗体在RA中阳性率达75.00%［6］。本研究结果显示，抗CCP抗体的灵敏度和特异度分别为76.92%、93.85%，是综合诊断水平相对较好的指标。

AKA 1979年被发现，是在RA血清中有一种能与鼠食管角质层反应的抗体，并对RA具有特异度而命名［7］，成分主要是IgG，由于对RA的诊断具有较高的特异度，可在RA发病前若干年出现，所以有早期诊断价值，且预后不佳。有研究表明，AKA对RA的平均阳性率> 46% ，特异度接近98%，被认为是RA最特异的生物学指标［8］。据报道有轻微关节炎且AKA阳性的“健康人”，几乎均可发展成典型的RA［9］。可见AKA在RA早期诊断中的作用。本文AKA检测对RA的特异度达90.77%，比陈志坚等［3］报道的95.00%低，可能与观察病例数有关。 AKA识别的靶抗原成分中含有环瓜氨酸，与抗CCP抗体有较好的重叠性。本文检测AKA和抗CCP抗体的特异度接近，但灵敏度AKA低于抗CCP抗体，可能与检测方法和试剂存在差异有关。

本研究检测结果发现，RA组3种抗体阳性率均明显高于非RA组，差异有统计学意义（P < 0.05）。单独检测3种抗体对RA诊断的灵敏度，由高到低依次为RF>抗CCP抗体 > AKA，特异度依次为抗CCP抗体 > AKA > RF，RF和抗CCP抗体灵敏度高，抗CCP抗体和AKA特异度高，有较好的临床使用价值；3种抗体不同方式联合检测使用串联诊断试验计算对RA诊断的灵敏度由高到低依次为：RF+抗CCP抗体 > RF+AKA > RF+AKA+抗CCP抗体 ；特异度由高到低依次为：RF+AKA+抗CCP抗体> RF+抗CCP抗体 > RF+AKA，说明不同方式的联合检测对RA诊断的灵敏度下降，但特异度提高，特别是3种抗体指标联合检测特异度高达98.46%，不易误诊，可提高RA的诊断率，是最好的组合。

研究结果还显示，在RF阴性的RA患者中，有抗CCP抗体和AKA阳性，提示抗CCP抗体、AKA的检测有助于发现RF阴性导致的漏诊，对临床症状不典型或X线片未出现异常的患者可起到早期诊断的作用。在抗CCP抗体阴性和AKA阴性的患者中，有RF阳性的，可见AKA和抗CCP抗体也不能取代RF的检测。也说明任何一种抗体单独检测对RA的诊断均有一定的局限性，3种指标各有优点，联合检测可互为补充，减少漏诊。

在检测方法上，AKA采用间接免疫荧光法，不易标准化，判断结果存在主观因素；抗CCP抗体采用ELISA法检测，操作简单，用酶标仪分析，客观准确。

RF、AKA和抗CCP抗体作为RA诊断的实验室指标，单独检测RF灵敏度最高，抗CCP抗体和AKA有较高的特异度。不同方式联合检测对RA诊断的灵敏度下降，但特异度升高，3种联合检测特异度最高，对RA的诊断、治疗、改善预后有较高的参考价值。

5参考文献

［1］中华医学会风湿病学分会.类风湿关节炎诊断及治疗指南［J］.中华风湿病学杂志,2010,14（4）:265-270.

［2］Susan J,Bartlett PhD.风湿病综合治疗［M］.3版.叶志中,高诚,译.沈阳:辽宁科学技术出版社,2008:151.

［3］陈志坚,何新发.联合检测RF和AKA对类风湿性关节炎的临床诊断价值［J］.广西医学,2007,29（9）:1406-1407.

［4］Schellekens GA,Visser H,de Jong BA,et al.The diagnostic properties of rheumatoid arthritis antibodies recognizing a cyclic citrullinated peptide［J］.Arthritis Rheum,2000,43（1）:155-163.

［5］刘喜德,蔡龙,周红娟,等.温经清化法治疗类风湿关节炎的临床及实验系列研究［J］.风湿病与关节炎,2013,2（9）:5.

［6］黄春晓,曹丽霞,吴艳鹏.抗CCP与RF检测在RA诊断中的意义［J］.检验医学与临床,2012,9（1）:

69-70.

［7］Young BJ,Mallya RK,Leslie RD,et al.Anti-keratin antibodies in rheumatoid arthritis［J］.Br Med J,1979,14（2）:97-99.

［8］Vincent C,Serre G,Lapeyre F,et a1.High diagnostic value in rheumatoid arthritis of antibodies to the stratum corneum of rat oesphagus epithelium,so called ‘antikeratin antibodies’［J］.Ann Rheum Dis,1989,48（9）:712-722.

［9］陈雪初,肖荣.类风湿因子与抗角蛋白抗体联合检测类风湿关节炎的诊断探讨［J］.中国现代医学杂志,2005,15（8）:1265-1268.

收稿日期：2014-03-26；修回日期：2014-05-26

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