pH值对大西洋鲑淀粉酶活性的影响

【摘 要】采用碘淀粉比色法测pH对大西洋鲑胃、肝脏、前肠、中肠、后肠中淀粉酶活性的影响。结果表明，大西洋鲑淀粉酶的活力均随着pH 的升高呈现先升后降的变化趋势。大西洋鲑胃、肝脏、前肠、中肠、后肠淀粉酶最适pH值分别为5.0、6.5、7.5、7.5、7.5。在各自最适pH下， 淀粉酶的活性顺序为肝脏>后肠>前肠>中肠>胃，各部位之间差异显著（P<0.05）。

【关键词】pH值；大西洋鲑；淀粉酶活性；消化酶；影响

大西洋鲑属鲑科鲑属的冷水性鱼类。大西洋鲑成鱼体形侧扁，呈流线型。头部无鳞，口端位，吻突出，口裂微斜，上下颌各具齿一列，上颌骨后端不达眼部。生殖季节雄鱼吻端突出，呈钩状，上下相对如钳形。背鳍较短居中，鳍条间具有黑色斑点，脂鳍肉质末端游离，脂鳍基部向前向下至侧线的鳞片为13枚，尾鳍幼鱼深叉形，成鱼为半月形。侧线鳞完全。体背部黑灰色或灰黄色并带有黑色斑点，体侧至腹部银白色。

消化酶是指由消化系统和消化腺分泌的，起营养和消化作用的酶类。对消化酶的特性进行研究，是认识消化酶的结构与功能关系，探讨消化酶作用机理的一种重要手段。对于鱼类消化道中消化酶的研究，是了解鱼类消化生理的重要内容，对于鱼类养殖过程中人工饵料的合理配制也具有重要意义。pH又是影响鱼类消化生理活动的重要因素之一，也是酶动力学的重要研究内容之一。有关pH对大西洋鲑消化酶活性的影响方面的研究报告至今仍较为少见。本文初步研究pH对大西洋鲑淀粉酶活性的影响。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用大西洋鲑采自长春市海水养殖科技示范基地，选取5尾体质健壮、无病无伤的大西洋鲑，体长（28.23±3.96）cm，体质量（304.18±17.46）g。

1.2 研究方法

1.2.1 设定淀粉酶活性测定的pH梯度

采用0.2mol/L醋酸缓冲液，在pH 5.0～8.5的范围内，以0.5 pH为梯幅，设置7个pH梯幅，用以测肝脏、前肠、中肠和后肠。在pH 2～8的范围内，以1 pH为梯幅，共设置7个pH梯幅，用以测胃。分别在各pH条件下，测酶的活性，反应温度（37±1） ℃。

1.2.2 酶液的制备

试验鱼采集后暂养于水族箱中，饥饿24h。处理时先测量鱼的体长及体质量，然后置于冰盘中解剖，分离出肝脏、胃、肠，剔除上面的脂肪，用双蒸水清洗肠、胃内的内容物，然后测其体积。分别取大西洋鲑的肝脏、胃、肠置于冰浴中，加其10倍体积的预冷重蒸水，在玻璃匀浆器中匀浆，匀浆液用超速真空离心机于4℃，9000 r/min离心30 min，取上清液用预冷重蒸水稀释，稀释至一定体积用作活性测定，至于冰箱中保存，24h内完成所有测定。

1.2.3 淀粉酶活性测定方法

采用碘-淀粉比色法。取2%淀粉液2ml，pH为7.0的0.2M磷酸缓冲液在（37±1）℃水浴中平衡，加酶液0.5ml，保温30min，于水中煮沸10min，然后用次亚碘法测定葡萄糖，取1ml反应液于碘量瓶中，加0.1M的碘液1ml，滴加0.15M的氢氧化钠1ml，摇匀，于室温下暗处静置20min。再加0.4ml3MH2SO4酸化。以0.025M的硫代硫酸钠滴定，指示剂为2%淀粉液，终点无色。

1.2.4 淀粉酶活性的定义

在pH 为7.0和（37±1）℃条件下水浴30min，淀粉水解每min产生1µg分子葡萄糖的酶量，为一个淀粉酶的活性单位。比活力定义为活性单位U·mg-1蛋白。

1.3 数据处理

试验数据用统计学方法进行处理，统计分析采用SPSS13.0统计软件，用SPSS13.0中AMOVA进行方差分析，LSD法进行多重比较，结果用平均值±标准误差（mean±SD）表示。

2 结果与分析

在不同的pH条件下，大西洋鲑不同部位消化道的淀粉酶活性变化如图1和图2所示，结果表明：胃在pH为5的酸性条件下，其淀粉酶的活性最高，前肠、中肠和后肠在pH为7.5中性偏碱性条件下，其淀粉酶的活性最高，而在酸性条件下，其淀粉酶的比活力比胃低，在碱性条件下，其淀粉酶的活性又较肝脏高。由图2可见，肝脏在pH为6.5左右，其淀粉酶的活性略高于前肠、中肠、后肠淀粉酶的活性，各组织在其各自最适pH值，淀粉酶的活性顺序为肝脏>后肠>前肠>中肠>胃，各部位之间差异显著（P<0.05）。

3 讨论

在本试验条件下，大西洋鲑对淀粉酶的消化作用主要是在中性偏酸条件下完成的。这一点与王重刚等[10]对真鲷的研究结果相反。国内外其它研究结果表明很多鱼类淀粉酶的最适pH值在碱性或中性偏酸性的范围内。倪寿文等[1，2]报告了草鱼、鲤鱼、鲢鱼、鳙鱼的肝胰脏和肠淀粉酶的最适pH分别为6.4和6.4，6.4和6.4，7.2和6.8，7.2和6.8。5种鱼的肝胰脏淀粉酶活性由高到低的顺序为：草鱼>鲤鱼>尼罗罗非鱼>鲢鱼>鳙鱼；肠淀粉酶活性由高到低的顺序为：尼罗罗非鱼>草鱼>鲤鱼>鲢鱼>鳙鱼，现有的研究表明：各种鱼类的肠淀

粉酶的最适pH为5.0～8.0。即从弱酸到弱碱，平均值近于中性，比肠蛋白酶的最适pH （8.3）低，与饱食后的肠液pH基本一致（6.8～7.8）。不同食性鱼类（草食、杂食和肉食）以及有胃鱼类（虹鳟和罗非鱼）和无胃鱼类（草鱼等鲤科鱼类）的肠淀粉酶的最适pH差异不

4 结论

大西洋鲑胃、肝脏、前肠、中肠、后肠淀粉酶最适pH分别为5.0、6.5、7.5、7.5、7.5，淀粉酶的活性顺序为肝脏>后肠>前肠>中肠>胃，各部位之间差异显著（P<0.05）。

参考文献

[1]倪寿文，桂远明，刘焕亮.草鱼、鲤、鲢、尼罗罗非鱼淀粉酶活性比较[J].大连水产学院学报，1992，7（1）：24-31.

[2]倪寿文，桂远明，刘焕亮.草鱼、鲤、鲢、尼罗罗非鱼肝胰脏和肠道蛋白酶活性的初步探讨[J].动物学报，1993，39（2）：160-168.

[3]黄耀桐，刘永坚.草鱼肠道肝胰脏蛋白酶活性的初步研究[J].水生生物学报，1988，（4）：328-333.

[4]田丽霞，林鼎.草鱼摄食两种蛋白质饲料后消化酶活性变动比较[J].水生生物学报，1993，17（1）：58-65.

[5]叶元土.鲤鱼肝胰脏和肠道淀粉酶活性研究[J].水产科学，1992，11（10）：14-16.

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